摘要：單純皰疹病毒1型(Herpes simplex virus type 1,HSV-1)潛伏感染期間LATs的活躍轉錄可能與其啟動子與增強子兩側的CTCF結合序列有關。本研究對位于UL56下游與LAT啟動子上游之間并與CTCF結合序列重疊存在的一個新開放讀碼框(本研究中命名為UL57)進行了鑒定。首先利用HSV-1(F)細菌人工染色體(HSV-BAC)系統(tǒng)構建重組病毒HSV-EGFP-UL57,將EGFP序列插入UL57 5’端;然后分別通過Northern Blot和Western Blot檢測EGFP標記的UL57的轉錄和表達;同時構建敲除UL57的重組病毒HSV-ΔUL57,觀察UL57對病毒增殖的影響。結果顯示,重組病毒HSV-EGFP-UL57感染HEp-2細胞17h后,EGFP探針檢測到兩條轉錄產物,其中1.8kb轉錄產物與預測大小相符;使用放線菌酮(Cycloheximide,CHX)阻斷病毒即刻早期蛋白/早期蛋白合成后,UL57轉錄受到明顯抑制。重組病毒HSV-EGFP-UL57感染Vero細胞后,9h可見融合蛋白表達,24h表達明顯;融合蛋白分子量與預測大小(58kD)一致。病毒生長曲線顯示,重組病毒HSV-EGFP-UL57及HSV-ΔUL57在Vero細胞中的增殖水平與HSV-1(F)基本一致。本研究表明,在HSV-1基因組(GenBank:GU734771.1)UL56下游與LAT啟動子上游之間存在一個新開放讀碼框UL57(116 921bp~117 799bp),UL57可以進行轉錄,且其轉錄受病毒即刻早期蛋白/早期蛋白調控;轉錄產物可以翻譯出融合蛋白,但表達水平較低。刪除UL57對病毒增殖無明顯影響。