摘要：從湖北省襄陽(yáng)市三九釀酒廠(chǎng)下水道污泥分離篩選得到產(chǎn)淀粉酶菌株HB-3,根據(jù)菌株生長(zhǎng)形態(tài)和生理生化特征分析,初步鑒定為短小芽孢桿菌。短小芽孢桿菌HB-3在淀粉培養(yǎng)基上培養(yǎng)72 h后,淀粉酶活力達(dá)到120.0 U/mL。然后使用DEAE-52和CM-52陰陽(yáng)離子交換層析柱對(duì)短小芽孢桿菌HB-3產(chǎn)生的淀粉酶進(jìn)行了部分純化。結(jié)果表明,短小芽孢桿菌HB-3中淀粉酶經(jīng)過(guò)部分純化后,純化倍數(shù)為5.9,酶活力回收率為90.9%。純化后的淀粉酶使用SDS-PAGE凝膠電泳研究,以標(biāo)準(zhǔn)蛋白為對(duì)照,計(jì)算出短小芽孢桿菌HB-3中淀粉酶分子量為56.5 kDa。同時(shí)對(duì)短小芽孢桿菌HB-3的淀粉酶進(jìn)行了純化特性研究,結(jié)果表明,該酶的酶促反應(yīng)最適溫度為50℃,40~60℃熱穩(wěn)定性良好;該酶的酶促反應(yīng)最適pH為5.0,pH 4.0~6.0酸堿穩(wěn)定性良好,該酶對(duì)底物淀粉的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)米氏常數(shù)Km為0.062 mmol/L,最大反應(yīng)速率Vmax為3.019 mmol/(L·min)。