摘要：建立穩(wěn)定的樹(shù)鼩(Tupaia belangeri)皮膚成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)體系,可為有關(guān)此類(lèi)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)和疾病樹(shù)鼩細(xì)胞模型提供技術(shù)支持。取樹(shù)鼩大腿內(nèi)側(cè)皮膚用組織塊貼壁法和膠原酶Ⅰ消化法分離皮膚細(xì)胞,胰蛋白酶差別消化法純化細(xì)胞;用MEM(10%FBS)完全培養(yǎng)基和含低血清生長(zhǎng)添加物(LSGS)的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞;免疫熒光和蛋白印跡法鑒定細(xì)胞,并測(cè)定細(xì)胞的生長(zhǎng)、凍存和復(fù)蘇特性。經(jīng)樹(shù)鼩皮膚細(xì)胞分離效果比較,膠原酶消化法比組織塊貼壁法更適合用于樹(shù)鼩原代皮膚細(xì)胞分離;對(duì)分離及凍存復(fù)蘇后細(xì)胞生長(zhǎng)狀況觀(guān)察比較發(fā)現(xiàn),添加了LSGS的MEM培養(yǎng)基更利于細(xì)胞存活、生長(zhǎng);細(xì)胞形態(tài)觀(guān)察、免疫熒光和蛋白印跡檢測(cè)鑒定所分離的細(xì)胞為樹(shù)鼩皮膚成纖維細(xì)胞。成功建立了樹(shù)鼩原代皮膚細(xì)胞的分離、純化方法,并優(yōu)化了該細(xì)胞的培養(yǎng)條件。