摘要：為制備鴨補體調(diào)節(jié)因子H(CFH)的多克隆抗體,從健康雛鴨的肝臟組織中提取總RNA及反轉(zhuǎn)錄合成cDNA,PCR擴增補體調(diào)節(jié)因子H基因的2個片段H1和H2,插入到載體pMD19-T,測序正確后,將目的基因分別克隆至原核表達載體pCold-TF,轉(zhuǎn)化至大腸埃希菌BL21(DE3),用IPTG誘導表達蛋白,重組蛋白經(jīng)SDS-PAGE檢測,鎳柱親和層析純化的重組蛋白免疫新西蘭大白兔,制備多克隆抗體。結(jié)果表明,成功構(gòu)建重組表達質(zhì)粒pCold-TF-H1和pCold-TF-H2,SDS-PAGE檢測重組蛋白為可溶性表達,TF-H1和TF-H2多克隆抗體效價均超過1∶10000。所制備的多克隆抗體可以為進一步研究鴨CFH的功能奠定基礎(chǔ)。