摘要：為制備兔出血癥病毒VP60單克隆抗體,利用HEK293T細(xì)胞瞬時(shí)表達(dá)VP60,免疫Balb/c小鼠,將小鼠脾細(xì)胞與SP2/0骨髓瘤細(xì)胞融合,間接ELISA篩選獲得陽(yáng)性克隆細(xì)胞株-5D11。利用血凝抑制(HI)、間接免疫熒光(IFA)和Westernblot等方法對(duì)5D11分泌的單克隆抗體活性進(jìn)行鑒定,并對(duì)其識(shí)別區(qū)域進(jìn)行了定位。結(jié)果顯示,5D11能抑制病毒凝集人“O”型紅細(xì)胞,與桿狀病毒表達(dá)的VP60蛋白發(fā)生特異性抗原抗體反應(yīng),且其識(shí)別VP60蛋白線性抗原表位,并定位于494aa-579aa區(qū)段。成功制備了抗VP60蛋白單克隆抗體,為開(kāi)展病原學(xué)檢測(cè)、流行病學(xué)研究等奠定了基礎(chǔ)。