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甘薯IbSSI基因啟動子序列的克隆及瞬時表達分析

作者:王雁楠; 楊育峰; 楊國紅; 張莉; 陳獻功; 徐心志; 劉慶昌; 翟紅; 何紹貞 河南省農業(yè)科學院糧食作物研究所; 鄭州450002; 中國農業(yè)大學; 農業(yè)農村部甘薯生物學與生物技術重點實驗室; 北京100193

摘要:植物可溶性淀粉合成酶(soluble starch synthase, SS)在植物支鏈淀粉的合成中起著關鍵作用,其主要負責支鏈的延伸。前期我們從甘薯中克隆到IbSSI基因并對其進行了表達分析及功能驗證,發(fā)現該基因在甘薯中的表達受到外源蔗糖的誘導以及晝夜節(jié)律的調控。本研究在此基礎上利用染色體步移法克隆到IbSSI基因1 811 bp的啟動子序列。PlantCARE在線分析表明IbSSI啟動子序列富含TATA-box和CAAT-box兩個基本元件,還含有與晝夜節(jié)律、光照、蔗糖、逆境響應及組織特異表達等相關的順式作用元件。將IbSSI基因全長啟動子及其6個啟動子5’端缺失片段分別替換植物表達載體pBI121的CaMV 35S啟動子并在本生煙草(Nicotiana benthamiana)葉片中進行瞬時表達。GUS染色結果表明不同長度片段的啟動子驅動β-葡萄糖醛酸酶基因(GUS)表達的能力有所差異,其中-200 bp~-369 bp區(qū)段以及-1 015 bp~-1 304 bp區(qū)段可能存在著增強轉錄的重要順式作用元件。本研究揭示了IbSSI基因受外源蔗糖誘導表達及晝夜節(jié)律調控的原因,并為進一步闡明IbSSI基因在甘薯淀粉生物合成中的作用提供了科學依據。

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