摘要：為加快油菜抗病基因克隆,促進(jìn)抗菌核病油菜育種。本研究根據(jù)已知NBS類植物抗病基因保守區(qū)P-loop和GLPL設(shè)計(jì)的兼并引物,對(duì)具有菌核病抗性的‘中雙9號(hào)’油菜材料進(jìn)行擴(kuò)增,PCR產(chǎn)物克隆測(cè)序。采用NCBI中的BLAST進(jìn)行序列比對(duì),DNAMAN 6.0查找ORF并翻譯成氨基酸序列,CDD查找蛋白保守域,通過MEGA 5構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。結(jié)果顯示:20條測(cè)序序列中,有1條序列(KB A1)與甘藍(lán)型油菜類抗病基因RGA14相似性較高,該序列編碼蛋白包含NBS-LRR類蛋白質(zhì)的NB-ARC保守結(jié)構(gòu)域。MEGA5進(jìn)化樹分析表明該序列與擬南芥RPM1、RPP8抗病基因編碼蛋白聚在一起。推測(cè)該序列可能與油菜抗病基因相關(guān),或者是抗病基因的一部分。本研究為進(jìn)一步對(duì)該序列進(jìn)行表達(dá)分析,研究其與油菜抗病性的關(guān)系提供理論依據(jù)。