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大群體轉(zhuǎn)基因大麥后代快速篩選研究

作者:李靜雯; 張正英; 王立光; 陳軍; 朱天地 甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所; 甘肅蘭州730070; 甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所; 甘肅蘭州730070

摘要:以攜帶有潮霉素標(biāo)記基因的RNAi轉(zhuǎn)基因大麥和常規(guī)大麥為材料,采用葉片涂抹法進(jìn)行了潮霉素篩選濃度確定及轉(zhuǎn)基因大麥T2代和回交后代的篩選和PCR檢測(cè)。結(jié)果表明,3000mg/L潮霉素連續(xù)涂抹3次,5d后轉(zhuǎn)基因大麥涂抹區(qū)域無(wú)受害癥狀,生長(zhǎng)受害率顯著低于無(wú)涂抹處理。潮霉素涂抹檢測(cè)結(jié)果與其PCR檢驗(yàn)結(jié)果的符合度為96.2%,目的基因篩選準(zhǔn)確率可達(dá)61.8%。表明所建立的活體幼苗潮霉素葉片涂抹法篩選轉(zhuǎn)基因大麥快速,直觀、準(zhǔn)確,具有一定可行性。

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甘肅農(nóng)業(yè)科技

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