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一株不對稱水解N-癸酰草銨膦生產L-草銨膦菌株的篩選及催化性質研究

作者:史泰龍; 趙文卓; 張朝暉 浙江工業(yè)大學生物工程學院; 杭州310014

摘要:從活性污泥樣品中分離得到一株能不對稱水解(D,L)-N-癸酰草銨膦的革蘭氏陰性菌。經過16SrDNA測序分子生物學鑒定,命名該菌株為Pseudomonas sp.zjut126。當(D,L)-N-癸酰草銨膦濃度為8g/L,濕菌體(含水75%):N-癸酰草銨膦=1∶1(w/w),反應24h,產物L-草銨膦得率為16.3%,eep>95%。該菌體催化的最適溫度為30℃,在溫度40℃以下催化穩(wěn)定性較好。最適pH為7,pH在6~8之間催化穩(wěn)定性較好。加入異丙醇有利于N-癸酰草銨膦的溶解,但對細胞催化活性有明顯的抑制作用。建立了一條利用Pseudomonas sp.zjut126細胞作催化劑拆分(D,L)-N-癸酰草銨膦制備L-草銨膦的工藝路線,第一步先將(D,L)-草銨膦化學酰化得到(D,L)-N-癸酰草銨膦,然后用菌株選擇性水解(D,L)-N-癸酰草銨膦生成L-草銨膦。將未反應的(D)-N-癸酰草銨膦與L-草銨膦進行分離,終產品L-草銨膦的含量是92.0%,ee值為95.2%。

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