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基于測序技術(shù)的海南地方豬TLR4基因多態(tài)性分析

作者:張艷; 劉海隆; 王文秀; 黃麗麗 海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所; ???71100; 海南省熱帶動物繁育與疫病研究重點實驗室; ???71100; 山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院; 山東濱州256600

摘要:為了了解海南地方豬TLR4基因的多態(tài)性,試驗采用PCR技術(shù)對五指山豬、臨高豬和屯昌豬的TLR4基因組序列進(jìn)行了克隆、測序,應(yīng)用DNAStar和BioEdit軟件分析其序列,SMART、SOPMA、SWISS-MODEL在線軟件分析TLR4蛋白的結(jié)構(gòu),并預(yù)測二級結(jié)構(gòu)和三級結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明:獲得的三個品種海南地方豬TLR4基因DNA序列全長均為10 435 bp,其中編碼區(qū)長2 526 bp,編碼841個氨基酸。三個品種豬TLR4基因序列種內(nèi)比對時,五指山豬在種內(nèi)有1個核苷酸位點存在多態(tài)性;屯昌豬在種內(nèi)有6個核苷酸位點存在多態(tài)性,2處位于編碼區(qū);臨高豬在種內(nèi)有3個核苷酸位點存在多態(tài)性,1處位于編碼區(qū)。三個品種豬TLR4基因序列種間比對時,有27個核苷酸位點存在多態(tài)性,其中2個為錯義突變,導(dǎo)致氨基酸改變。三個品種豬的TLR4基因序列的同源性在99.8%~99.9%之間,高度保守。海南豬TLR4基因在7 209位點的G→T突變和7 781位點的G→A位點突變引起了TLR4蛋白二級結(jié)構(gòu)和三級結(jié)構(gòu)發(fā)生改變。說明海南地方豬TLR4基因存在多態(tài)性,并且其多態(tài)性引起的結(jié)構(gòu)改變可能使TLR4基因功能發(fā)生變化。

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黑龍江畜牧獸醫(yī)

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