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細(xì)菌超聲分散計(jì)數(shù)儀在微生物實(shí)驗(yàn)前處理中的應(yīng)用

作者:馮通明; 肖美方; 王威; 崔小穎; 吳智龍; 周杰 佛山市第四人民醫(yī)院結(jié)核病科; 528000; 佛山市第四人民醫(yī)院檢驗(yàn)科; 528000

摘要:目的探究細(xì)菌超聲分散計(jì)數(shù)儀在微生物實(shí)驗(yàn)前處理中的應(yīng)用價(jià)值。方法以9種不同菌種為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,通過(guò)肉眼觀察、革蘭染色鏡檢和菌液濁度檢測(cè),對(duì)比傳統(tǒng)手工分散方法和儀器超聲分散方法制備菌懸液的分散效果和對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)活性的影響。結(jié)果7種菌需使用低檔功率,2種菌需要使用中檔功率。不同菌種超聲處理時(shí)間不同,最長(zhǎng)120s,最短10S。經(jīng)儀器分散獲得的菌懸液普遍均勻度更佳,無(wú)明顯菌的團(tuán)聚現(xiàn)象。鮑曼不動(dòng)桿菌、肺炎克雷伯菌和嗜麥芽窄食單胞菌等菌株經(jīng)手工分散和儀器分散的效果沒(méi)有明顯差異;超聲處理30s即可達(dá)到較為理想的分散效果,延長(zhǎng)處理時(shí)間對(duì)大部分菌液濁度沒(méi)有發(fā)生明顯變化,但鮑曼不動(dòng)桿菌、陰溝腸桿菌和大腸埃希菌隨超聲分散時(shí)間的延長(zhǎng)而菌液濁度明顯下降,肺炎克雷伯菌超聲處理60S時(shí)菌液濁度達(dá)到最大值,延長(zhǎng)處理時(shí)間濁度逐漸下降。在1:10。稀釋度下,大腸埃希菌經(jīng)儀器分散后的平板菌落數(shù)均值[(59±6)×10^5菌落形成單位(CFU)/m1)]明顯低于手工分散者[(76±8)×10^5CFU/ml)](F=10.321,P=0.033);諾卡菌屬經(jīng)儀器分散后的平板菌落數(shù)均值[(9±6)×10^5CFU/m1)]明顯高于手工分散者[(2±0)×10^5CFU/ml](F=8.693,P=0.015);其他7種菌種用儀器分散和手工分散獲得的菌懸液不存在明顯的生長(zhǎng)活性差異。結(jié)論與手工分散方法相比,細(xì)菌超聲分散計(jì)數(shù)儀對(duì)各參試菌種的分散效果好,耗時(shí)較短,不會(huì)明顯影響菌體的生長(zhǎng)活性,能為菌懸液制備提供一套安全、高效、標(biāo)準(zhǔn)化的解決方案,在微生物實(shí)驗(yàn)前處理中具有較高的應(yīng)用價(jià)值。

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結(jié)核病與肺部健康

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