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四種鱗翅目害蟲精氨酸激酶基因的表達譜及基于RNAi的功能分析

作者:魯艷輝; 白琪; 鄭許松; 田俊策; 呂仲賢 浙江省農(nóng)業(yè)科學院植物保護與微生物研究所; 省部共建農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全國家重點實驗室(籌); 杭州310021

摘要:【目的】精氨酸激酶(arginine kinase,AK)(EC2.7.3.3)是昆蟲體內(nèi)重要的磷酸原激酶(能量代謝調(diào)節(jié)因子),也是唯一能夠形成有效ATP的磷酰基供體,起著與脊椎動物中肌酸激酶相同的作用。本研究旨在了解鱗翅目害蟲AK基因的表達和功能。【方法】利用qRT-PCR方法測定AK基因在大螟Sesamia inferens、二化螟Chilo suppressalis、甜菜夜蛾Spodoptera exigua和斜紋夜蛾Spodoptera litura這4種鱗翅目害蟲不同發(fā)育階段和3齡幼蟲不同組織中的表達譜;通過終點法檢測了這4種害蟲不同發(fā)育階段和幼蟲不同組織中的AK酶活性;采用RNAi技術(shù)抑制該基因的表達并分析其功能?!窘Y(jié)果】AK基因在大螟、二化螟、甜菜夜蛾和斜紋夜蛾這4種鱗翅目昆蟲的不同發(fā)育階段和3齡幼蟲不同組織中均有表達,說明該基因的表達不具有發(fā)育時期和組織特異性。不同發(fā)育時期和3齡幼蟲不同組織中AK酶活性與基因表達量變化趨勢大體一致。注射以AK基因為靶標的dsRNA6d后,4種害蟲體內(nèi)AK基因的mRNA表達下降30%~50%,AK酶活性降低30%左右;14d后幼蟲的死亡率達50%左右,顯著高于對照組幼蟲的死亡率?!窘Y(jié)論】AK基因在上述4種鱗翅目害蟲中為組成型表達,RNAi抑制AK基因的表達可導致4種害蟲的幼蟲死亡,研究結(jié)果為開發(fā)以AK基因為靶標的鱗翅目害蟲防治新技術(shù)提供了理論依據(jù)。

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