摘要：目的:目前,中國(guó)是世界上肝癌發(fā)病率和死亡率持續(xù)上升的國(guó)家之一。5-fluorouracil(5-FU)是消化道腫瘤治療的常用化療藥物,其臨床用藥表明,隨著5-FU劑量的增大其藥物毒副作用逐漸增大,5-FU的毒副作用已成為其臨床應(yīng)用的瓶頸問(wèn)題,因此急需開(kāi)發(fā)新型低毒副作用的肝癌臨床治療藥物。中藥因其具有多靶點(diǎn)、低毒性、整體調(diào)節(jié)的作用,越來(lái)越受到全世界的關(guān)注,因而從中藥中尋找降低5-FU用量同時(shí)增強(qiáng)5-FU抗腫瘤作用的藥物或許是潛在的肝癌治療手段。解毒消癥飲(JXD)屬于臨床驗(yàn)方,應(yīng)用于消化道腫瘤特別是肝癌治療已10年有余。前期研究發(fā)現(xiàn),JXD通過(guò)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、阻滯細(xì)胞周期及抑制血管新生等方式抑制腫瘤生長(zhǎng)。本研究中我們?cè)u(píng)估了解毒消癥飲乙酸乙酯部位(EE-JXD)聯(lián)合5-FU的抗腫瘤作用,探討JXD的生物學(xué)作用機(jī)制,以期為JXD的臨床應(yīng)用提供更多的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:EE-JXD按照本研究曾的方法制備,再用DMSO稀釋為200 mg/mL的儲(chǔ)存液用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)?zāi)敢?采用生理鹽水進(jìn)一步配制為6 mg/mL動(dòng)物實(shí)驗(yàn)用藥。HepG2細(xì)胞用含有10%胎牛血清、1%抗生素的RPMI-1640培養(yǎng)液培養(yǎng),培養(yǎng)條件為37℃、5%CO2,HepG2正常培養(yǎng)后取對(duì)數(shù)期細(xì)胞種板,采用不同藥物濃度的EE-JXD(0.05、0.1、0.2、0.4 mg/mL),5-FU (0.05、0.1、0.2、0.4 mg/mL),EE-JXD+5-FU [(0.05+0.05)、(0.1+0.1)、(0.2+0.2)、(0.4+0.4)mg/mL]干預(yù)24 h后,經(jīng)MTT檢測(cè)細(xì)胞活力。細(xì)胞被分為對(duì)照組、EE-JXD組(0.1 mg/mL)、5-FU組(0.1 mg/mL)、EE-JXD+5-FU組[(0.1+0.1)mg/mL]共4組,藥物干預(yù)24 h后,Hochest 33258染色后通過(guò)熒光顯微鏡觀察HepG2細(xì)胞凋亡的發(fā)生情況,AnnexinⅤ-FITC/propidium iodide (PI)標(biāo)記后流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡和晚期凋亡率。在32只BALB/c(nu/nu)體質(zhì)量為18~22 g小鼠皮下建立HepG2細(xì)胞的移植瘤模型,HepG2細(xì)胞密度為5×10^6/mL被注入右前肢皮下,7 d后小鼠被隨機(jī)分為4組{對(duì)照組(生理