摘要：為了更加靈敏地檢測(cè)水果中毒死蜱農(nóng)藥殘留,研究建立基于實(shí)時(shí)熒光定量PCR (qPCR)的高靈敏生物條形碼免疫分析方法。研究將毒死蜱半抗原與雞卵清白蛋白(OVA)結(jié)合,再將此偶聯(lián)物連接到磁性納米顆粒上,另將毒死蜱特異性抗體、生物條形碼以及經(jīng)巰基修飾的與生物條形碼互補(bǔ)DNA鏈連接到膠體金納米顆粒上,隨后待檢毒死蜱分子會(huì)與固定在磁性納米顆粒上的半抗原競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合膠體金納米顆粒上的抗體,最后將生物條形碼解離下來(lái),通過(guò)qPCR檢測(cè), DNA相對(duì)量與待檢農(nóng)藥的含量成負(fù)相關(guān)。研究結(jié)果表明,該方法的最低檢測(cè)限是0.27μg/L, IC50為19.3μg/L,線性范圍是1~1 000μg/L。在蘋(píng)果和梨兩種基質(zhì)中平均添加回收率為79%~90%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為11%~16%。因此,該方法的建立對(duì)于實(shí)際樣品的檢測(cè)具有重要意義。