摘要:目的用體外無血清培養(yǎng)體系分離培養(yǎng)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞。方法取1例足月妊娠剖宮產(chǎn)健康胎兒臍帶,采用組織塊貼壁培養(yǎng),使用無血清培養(yǎng)體系培養(yǎng)獲得人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞。通過形態(tài)學(xué)觀察,成脂、成骨、成軟骨誘導(dǎo)分化能力檢測及流式細(xì)胞術(shù)免疫表型檢測進(jìn)行鑒定。結(jié)果組織塊貼壁培養(yǎng)6天后可見細(xì)胞從組織塊邊沿爬出;培養(yǎng)15天后,達(dá)到80%匯合,生長狀況良好,細(xì)胞呈梭形,為典型的成纖維細(xì)胞形態(tài),極性整齊排列,集落呈渦旋狀,形態(tài)較均一。傳代培養(yǎng)的第三代細(xì)胞CD29、CD44、CD90、CD105均為陽性表達(dá),不表達(dá)CD34和CD45,均具有成脂、成骨、成軟骨分化的能力。結(jié)論無血清培養(yǎng)體系組織塊貼壁法分離培養(yǎng)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞法成功率高,其生物學(xué)特性穩(wěn)定,并能消除由未確定的病原體引起的風(fēng)險(xiǎn)。
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