摘要：【目的】探究GalDH和GalLDH在甜櫻桃果實AsA生物合成中的作用?！痉椒ā勘狙芯恳蕴饳烟摇籼馘\’(Satonishiki)果實為材料,采用改良CTAB法提取總RNA,運用RT-PCR法,克隆并分析了抗壞血酸L-半乳糖合成途徑PacGalDH和PacGalLDH基因的cDNA全長序列。此外,采用實時熒光定量PCR分析了兩基因在甜櫻桃果實發(fā)育過程的表達?！窘Y果】獲得了1 253 bp長的PacGalDH cDNA序列,其中含有975 bp完整的開放閱讀框(ORF),編碼324個氨基酸殘基。獲得了1 914 bp長的PacGalLDH c DNA序列,含有1 791 bp完整的ORF,編碼596個氨基酸。通過氨基酸序列比對發(fā)現(xiàn),PacGalDH和PacGalLDH氨基酸序列均與梅和桃對應的氨基酸序列具有較高的同源性,達98%。實時熒光定量PCR分析表明,PacGalDH和PacGalLDH在甜櫻桃果實不同發(fā)育階段均有表達,均在花后10 d達到最大表達量,隨后逐漸下降。并且,果實總抗壞血酸(T-AsA)含量在花后0 d最高,達44.7 ng/g,此后呈下降趨勢?！窘Y論】在果實生長發(fā)育過程中,PacGalDH的表達量變化與T-AsA水平變化趨勢基本一致,初步推測PacGalDH可能是甜櫻桃AsA生物合成的關鍵酶。