摘要：利用PCR結(jié)合變性高效液相色譜法快速檢測大腸埃希菌喹諾酮耐藥決定區(qū)gyrA基因和gyrB基因突變。方法:對22株喹諾酮耐藥大腸埃希菌進行2種基因的PCR擴增,產(chǎn)物經(jīng)DNA雜交形成同源和異源雙鏈后進行變性高效液相色譜法檢測和序列測定。結(jié)果:20株試驗菌gyrA基因出現(xiàn)異常峰型,14株試驗菌gyrB基因出現(xiàn)異常峰型。測序證實所有異常峰型的樣本均存在突變位點,正常單峰則無突變位點。其中g(shù)yrA基因存在Ser83Leu和Asp87Asn突變,突變率分別為90.9%和86.4%;gyrB基因存在Glu185Asp突變,突變率為4.5%,兩種基因均存在多個位點的同義突變。結(jié)論:DHPLC方法可用于快速檢測大腸埃希菌gyrA和gyrB基因突變。