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逐級鹽析結(jié)合雙水相法純化貫筋藤凝乳酶

作者:趙瓊; 王庭伊; 黃艾祥 云南農(nóng)業(yè)大學食品科學技術(shù)學院; 云南昆明650201

摘要:為了高效制備貫筋藤凝乳酶,利用逐級鹽析結(jié)合雙水相萃取對貫筋藤凝乳酶進行純化,研究成相物質(zhì)、聚乙二醇(PEG)/鹽最佳純化配比及酶用量對酶凝乳純化的影響,應用SDS-PAGE電泳技術(shù)檢測貫筋藤凝乳酶的純度。結(jié)果表明:當硫酸銨飽和度區(qū)間為20%~40%,貫筋藤粗酶比活力較高,為167.846 MCA/mg;當PEG相對分子質(zhì)量為6000且質(zhì)量分數(shù)為20.57%、鹽相為硫酸銨且質(zhì)量分數(shù)為14.74%,酶用量為1.0 m L時,貫筋藤凝乳酶活力提高1.87倍。電泳圖顯示貫筋藤凝乳酶純度較高,分子量約為25 kDa。利用雙水相法分離純化可獲得高純度的貫筋藤凝乳酶,可為貫筋藤凝乳酶后續(xù)規(guī)?;a(chǎn)及應用提供參考價值。

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