摘要:為探討泛素樣含PHD和環(huán)指域蛋白1(UHRF1)基因在三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)發(fā)育過程中的作用,實(shí)驗(yàn)采用SMART RACE方法,克隆了三疣梭子蟹UHRF1(PtUHRF1)基因。該基因cDNA全長(zhǎng)為2849 bp,開放閱讀框(ORF)為2298 bp,預(yù)測(cè)其編碼1個(gè)含有765個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)。結(jié)構(gòu)域分析顯示,該蛋白質(zhì)包含UBL、PHD、TTD、SRA、RING finger 5個(gè)功能結(jié)構(gòu)域。同源分析表明,三疣梭子蟹PtUHRF1的氨基酸序列與其他物種有較高的同源性。qRT-PCR結(jié)果顯示,PtUHRF1基因在三疣梭子蟹所有組織中均有表達(dá),但在精巢中表達(dá)量顯著高于其他組織。該基因在胚胎和幼體發(fā)育不同時(shí)期表達(dá)差異顯著,在受精卵中的表達(dá)量最高,并顯著高于胚胎發(fā)育其他時(shí)期,是多細(xì)胞時(shí)期表達(dá)量的2.5倍。PtUHRF1基因在性腺發(fā)育不同時(shí)期表達(dá)存在顯著差異,在卵巢II期表達(dá)量達(dá)到峰值,之后逐漸下降;在精巢Ⅰ期的表達(dá)量最高,隨著精巢發(fā)育逐漸下降。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,PtUHRF1參與了三疣梭子蟹胚胎、幼體和性腺發(fā)育調(diào)控,為進(jìn)一步深入研究該基因在三疣梭子蟹及甲殼動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育中的作用提供參考。
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