摘要:游離小孢子培養(yǎng)技術(shù)是快速創(chuàng)制連州菜心雙單倍體純系的一條有效途徑,為建立高效的連州菜心小孢子培養(yǎng)體系,應(yīng)用于優(yōu)勢雜交育種實(shí)踐,以引進(jìn)的3個(gè)廣東省連州市地方菜心品種遲熟連州菜心(17AY007)、連州尺寸心(17AY008)和連州尖葉遲菜心(17AY009)為試材進(jìn)行小孢子培養(yǎng),研究不同基因型和植物生長調(diào)節(jié)劑(蕓薹素內(nèi)酯,BR及噻苯隆,TDZ)對小孢子胚胎發(fā)生及植株再生的影響,并對獲得的連州菜心小孢子再生植株進(jìn)行倍性鑒定。結(jié)果表明:3個(gè)不同基因型連州菜心的小孢子胚胎發(fā)生率無顯著差異;在NLN-13培養(yǎng)基中添加適宜濃度的BR或TDZ可顯著提高連州菜心小孢子胚胎發(fā)生率和直接成苗率,其中,當(dāng)BR濃度為0.04mg·L^-1時(shí),17AY007和17AY009的胚誘導(dǎo)率和直接成苗率均達(dá)到最高(2.38胚·蕾^-1,72.82%;2.83胚·蕾^-1,54.62%);當(dāng)TDZ濃度為0.1mg·L^-1和0.2mg·L^-1時(shí),17AY007的胚誘導(dǎo)率和直接成苗率分別達(dá)到最高(2.67胚·蕾^-1,57.76%);TDZ濃度為0.3mg·L^-1時(shí),17AY009的胚誘導(dǎo)率和直接成苗率均達(dá)到最高(2.42胚·蕾^-1,57.36%);3種連州菜心再生植株的雙單倍體率均在56%以上,其中,17AY007雙單倍體率最高,為64.29%。綜上,創(chuàng)制了雙單倍體植株42株,為連州菜心優(yōu)勢雜交育種奠定了材料基礎(chǔ)。
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