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氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗體復(fù)合物促進(jìn)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞活性氧生成并誘導(dǎo)其凋亡

凋亡
作者:陳芋丹; 周紅; 何超; 王婷; 張貴婷; 張鵬; 王韌; 吳倩倩; 姚雨葉 江蘇大學(xué)醫(yī)學(xué)院; 江蘇鎮(zhèn)江212013

摘要:目的探討氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗體(oxLDL/β2GPI/aβ2GPI)復(fù)合物對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)凋亡的影響以及ROS活性氧(ROS)在其中的作用。方法分別用β2GPI、 aβ2GPI、β2GPI/aβ2GPI復(fù)合物、 oxLDL、 oxLDL/β2GPI復(fù)合物、 oxLDL/β2GPI/兔IgG(R-IgG)復(fù)合物、 oxLDL/β2GPI/aβ2GPI復(fù)合物刺激HUVEC,利用Western blot法檢測凋亡相關(guān)蛋白BAX、 Bcl2和裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)的蛋白水平;異硫氰酸熒光素標(biāo)記的膜聯(lián)素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)雙標(biāo)記結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率、二氯熒光素二乙酸酯(DCFH-DA)標(biāo)記結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞ROS水平;CCK-8法檢測各處理組對HUVEC活力的影響;采用抗氧化劑羅布麻寧(apocynin)或二苯基碘氯化物(DPI)預(yù)處理后觀察ROS水平的改變以及對oxLDL/β2GPI/aβ2GPI復(fù)合物誘導(dǎo)的HUVEC凋亡的影響。結(jié)果 oxLDL/β2GPI/aβ2GPI復(fù)合物能顯著降低HUVEC的活力,增加細(xì)胞BAX、 c-caspase-3蛋白水平,降低Bcl2蛋白水平,促進(jìn)HUVEC凋亡;oxLDL/β2GPI/aβ2GPI復(fù)合物引起細(xì)胞ROS水平升高,抗氧化劑處理后,細(xì)胞內(nèi)ROS水平降低,細(xì)胞凋亡減少。結(jié)論 oxLDL/β2GPI/aβ2GPI復(fù)合物可以通過提高ROS來誘導(dǎo)HUVEC凋亡。

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細(xì)胞與分子免疫學(xué)

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