摘要:為探究miR-18a對(duì)豬卵巢顆粒細(xì)胞凋亡的調(diào)控作用,利用生物信息學(xué)分析、熒光素酶活性檢測(cè)和體外培養(yǎng)顆粒細(xì)胞試驗(yàn)驗(yàn)證miR-18a對(duì)CTGF的靶向作用及其在豬顆粒細(xì)胞中對(duì)CTGF基因表達(dá)的影響,并通過(guò)流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)其對(duì)豬卵巢顆粒細(xì)胞凋亡的調(diào)控作用。生物信息學(xué)分析結(jié)果表明,CTGF是miR-18a的潛在靶基因,熒光素酶活性檢測(cè)進(jìn)一步驗(yàn)證了miR-18a與CTGF的結(jié)合。在培養(yǎng)的顆粒細(xì)胞中轉(zhuǎn)染miR-18a模擬物后,qRT-PCR和Western blot結(jié)果顯示CTGF的mRNA和蛋白水平均顯著降低,流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)表明miR-18a顯著促進(jìn)顆粒細(xì)胞的凋亡。而轉(zhuǎn)染miR-18a抑制劑后,豬顆粒細(xì)胞的凋亡率顯著降低,共轉(zhuǎn)染miR-18a抑制劑和CTGF的干擾RNA后,顆粒細(xì)胞的凋亡率呈現(xiàn)回升。試驗(yàn)結(jié)果表明miR-18a通過(guò)靶向結(jié)合CTGF基因調(diào)控豬顆粒細(xì)胞的凋亡。
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