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鈴鐺子發(fā)根誘導(dǎo)體系及培養(yǎng)條件的優(yōu)化

作者:趙凱輝; 范雨芳; 徐元江; 曹芳; 蘭小中; 廖志華 西南大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院/三峽庫(kù)區(qū)生態(tài)環(huán)境教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 西藏農(nóng)牧學(xué)院/西南大學(xué)-西藏農(nóng)牧學(xué)院藥用植物聯(lián)合研發(fā)中心

摘要:鈴鐺子(Anisodus luridus)是西藏特有的托品烷生物堿藥源植物.利用農(nóng)桿菌C58C1(pRiA4)侵染鈴鐺子不同器官考察發(fā)根誘導(dǎo)頻率,并考察了7種培養(yǎng)基(1/2MS,MS,1/2B5,White,WPM,B5和N6)對(duì)發(fā)根生物量和托品烷生物堿質(zhì)量分?jǐn)?shù)的影響.真葉和莖段的發(fā)根誘導(dǎo)頻率分別為53.33%和60.00%,子葉不能誘導(dǎo)出發(fā)根.PCR表明rolB和rolC基因已整合到發(fā)根的基因組中.B5培養(yǎng)基最適于鈴鐺子發(fā)根生物量和托品烷生物堿積累,發(fā)根鮮質(zhì)量和干質(zhì)量分別達(dá)到6.9±0.94g/瓶和0.44±0.06g/瓶;發(fā)根中莨菪堿質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.49±0.13mg/g.B5和1/2B5培養(yǎng)基中發(fā)根的東莨菪堿質(zhì)量分?jǐn)?shù)高于其他的培養(yǎng)基,分別為1.37±0.06mg/g和1.43±0.22mg/g,二者之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.在B5培養(yǎng)基中發(fā)根總生物堿產(chǎn)量也是最高的,為2.1±0.29mg/瓶.研究結(jié)果為利用發(fā)根規(guī)模化生產(chǎn)莨菪堿和東莨菪堿奠定了基礎(chǔ).

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