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半夏當(dāng)歸赤小豆湯含藥血清抑制肺癌A549細(xì)胞增殖、侵襲和遷移的作用及機(jī)制研究

作者:黨輝; 關(guān)徐濤; 萬姜維; 張淑香 河南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院血液腫瘤科; 鄭州市450000

摘要:目的探索半夏當(dāng)歸赤小豆湯含藥血清對(duì)肺癌A549細(xì)胞增殖、侵襲和遷移的作用及機(jī)制.方法將肺癌A549細(xì)胞分為對(duì)照組(Control),半夏當(dāng)歸赤小豆湯低劑量(low-dosage, LD)、中劑量(meddledosage,MD))和高劑量組(high-dosage,HD);不同劑量含藥血清分別處理細(xì)胞后,CCK8試劑盒檢測(cè)細(xì)胞增殖,Hoechst染色法檢測(cè)細(xì)胞凋亡,Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲,劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移,免疫印跡法檢測(cè) PCNA、BCL-2、BAX、VEGF、MMP-2、MMP-9、TGF-B、SMAD2 和 SMAD3 的表達(dá)。裸鼠皮下注射肺癌A549細(xì)胞建立移植瘤模型.并分為Control, LD、MD和HD組;不同劑量半夏當(dāng)歸赤小豆湯灌胃給藥后,觀察各組裸鼠存活情況,測(cè)量各組皮下腫瘤生長(zhǎng)體積.并用Tunel檢測(cè)腫瘤組織細(xì)胞凋亡,免疫組化檢測(cè)腫瘤組織中Ki67及VEGF表達(dá)情況結(jié)果與Control組比較.半夏當(dāng)歸赤小豆湯組細(xì)胞增殖速率及PCNA表達(dá)顯著降低,凋亡細(xì)胞百分比及BAX表達(dá)顯著升高.BCL-2表達(dá)顯著減少,細(xì)胞劃痕閉合率和侵襲細(xì)胞數(shù)顯著降低,VEGF、MMP-2, MMP-9、TGF-β、SMAD2和SMAD3表達(dá)顯著減少;與Control組比較,灌胃半夏當(dāng)歸赤小豆湯裸鼠存活率明顯提高,皮下腫瘤組織體積顯著減小,凋亡細(xì)胞百分比顯著升高,Ki67及VEGF陽性細(xì)胞所占比率顯著降低;效果隨著給藥量增加而增強(qiáng)。結(jié)論半夏當(dāng)歸赤小豆湯含藥血清可顯著降低肺癌A549細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移能力,抑制細(xì)胞中TGF-β/SMAD信號(hào)通路的激活。

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