摘要:目的分析不同固定液及固定時間對冷凍切片免疫組化染色的影響,尋找冷凍切片免疫組化染色最佳固定條件。方法收集新鮮送檢的乳腺、肺、甲狀腺手術(shù)切除標本共15例,冷凍切片后分別置于4種不同固定液(冷丙酮、95%乙醇、4%中性甲醛液、AAF液)中固定5 min和2 h,并對經(jīng)4%中性甲醛液和AAF液固定的各2張切片進行熱修復(fù),根據(jù)組織含有的特定抗原進行相應(yīng)抗體的免疫組化染色。結(jié)果采用4種不同固定液固定冷凍切片,均可滿足快速病理診斷的需要,但染色細節(jié)存在差異;從5個方面綜合分析,AAF液的染色效果優(yōu)于其他3種固定液,其次為95%乙醇、4%中性甲醛、冷丙酮;就陽性強度而言,冷丙酮最強,其次為AAF液、4%中性甲醛、95%乙醇;冷凍切片固定5 min和2 h,除固定2 h陽性強度略強于固定5 min外,其他方面均無明顯差異;4%中性甲醛液固定的切片經(jīng)熱修復(fù)后與未修復(fù)相比組織脫片破損嚴重,組織結(jié)構(gòu)不清晰,但細胞恢復(fù)正常大小;AAF液固定的切片經(jīng)熱修復(fù)后與未修復(fù)相比有輕微脫片,其他方面無明顯差異。結(jié)論冷凍切片進行免疫組化染色,AAF液的固定效果優(yōu)于其他3種固定液;采用AAF液對冷凍切片固定5 min且不修復(fù),整體操作時間短、染色效果好,是冷凍切片免疫組化染色非常理想的固定條件。
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