摘要：為建立一種基于TaqMan探針法定量檢測霍亂弧菌的三重?zé)晒舛縋CR方法,以霍亂弧菌種特異性基因ompW和毒力基因ctx、hly為靶基因,分別設(shè)計特異性引物及相應(yīng)的TaqMan探針。在ompW、ctx、hly探針的5’端分別標(biāo)記CY5、FAM、HEX熒光報告基團(tuán),3’端均標(biāo)記BHQ1熒光淬滅基團(tuán)。結(jié)果顯示,本試驗建立的三重?zé)晒舛縋CR方法與其他菌株無交叉反應(yīng),其最低檢出限達(dá)到了10 CFU/m L,重復(fù)性試驗中每組變異系數(shù)均小于1.4%;檢測人工染菌的蝦肉和貝類樣品時,最低檢出限也達(dá)到1×102CFU/m L。結(jié)果表明,本實驗室建立的三重?zé)晒釶CR檢測方法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)和重復(fù)性好的特點,是高通量檢測致病性霍亂弧菌的有效手段。