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膠質瘤miR-218與細胞周期蛋白依賴性激酶6表達的相互關系及其對腫瘤細胞增殖和凋亡的影響

作者:張景敏; 孫翠云; 于士柱; 王虔; 安同嶺; 李艷艷; 孔妍玲; 溫艷軍 天津醫(yī)科大學總醫(yī)院天津市神經(jīng)病學研究所天津市神經(jīng)損傷變異與再生重點實驗室教育部中樞神經(jīng)創(chuàng)傷修復與再生重點實驗室; 300052

摘要:目的探討膠質瘤細胞中miR-218及細胞周期蛋白依賴性激酶6(CDK6)表達變化的相互關系及其對腫瘤細胞增殖及凋亡的影響。方法采用組織微陣列、鎖定寡核苷酸探針原位雜交及免疫組織化學(ABC法)方法,檢測60例不同級別膠質瘤組織標本及10例對照腦組織中miR-218、CDK6及Ki-67抗原的表達狀況,并分析三者之間的相互關系;膠質母細胞瘤細胞系(U87MG)分別被轉染陰性對照序列(對照組)及miR-218mimics(mimics組),采用即時定量聚合酶鏈反應(qRT-PCR)及免疫細胞化學方法分別檢測兩組細胞中的miR-218水平及CDK6和Ki-67表達變化,用單細胞凝膠電泳檢測凋亡細胞。結果對照組、I~Ⅱ級、Ⅲ級和Ⅳ級膠質瘤組miR-218陽性標記指數(shù)(LI,%)分別為22.45±0.59、4.00±1.07、1.87±1.06、0.94±0.78,四組問差異均有統(tǒng)計學意義(P〈0.05);各組CDK6L1分別為7.254-1.20、16.71±0.80、24.43±0.62、32.05±0.43,對照組與各膠質瘤組問及Ⅳ級組與I~Ⅱ級組間差異有統(tǒng)計學意義(P〈0.01);各組Ki-67陽性細胞密度分別為0.00±0.00、9.30±3.48、31.15±9.44、60.15±13.60[(面-4-s)/0.05mm。],各組間差異均有統(tǒng)計學意義(P〈0.01);miR一218LI與CDK6LI及Ki-67陽性細胞密度問均呈顯著性負相關(r:-0.480,-0.534,P〈0.01),后兩者問呈顯著性正相關(r=0.530,P〈0.01)。mimics組的miR-218水平明顯高于對照組,其CDK6及Ki-67LI(14.74±1.19、30.88±3.31)均明顯低于對照組(79.06±2.07、64.94±3.96,P〈0.01),而凋亡指數(shù)(68.44±7.05)明顯高于對照組(13.04±0.97),以上各指標兩組間差異均有統(tǒng)計學意義(P〈0.01)。結論miR-218表達水平是評價膠質瘤良惡性程度的重要參考指標;其表達異常減少可導致膠質瘤細胞CDK6表達及增殖活性增強;補充外源性

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