摘要:目的:制備納米粒載體DMP,對(duì)其進(jìn)行表征的測(cè)定,研究DMP介導(dǎo)的Bcl-xl siRNA的抗腫瘤活性。方法:采用MTT法對(duì)納米粒的細(xì)胞毒性進(jìn)行測(cè)定;通過Q-PCR法檢測(cè)mRNA的含量,檢測(cè)DMP遞送Bcl-xlsiRNA入C26細(xì)胞的基因沉默效果;通過MTT法研究DMP/si RNA對(duì)C26細(xì)胞的抗腫瘤效果,測(cè)定其對(duì)C26細(xì)胞的腫瘤抑制作用;用克隆形成實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明DMP/siRNA能夠抑制C26細(xì)胞生長,具有顯著的抗腫瘤活性;采用碘化丙啶(PI)染色法流式細(xì)胞術(shù)來分析經(jīng)過DMP/siBcl-xl治療的C26細(xì)胞的凋亡率。結(jié)果:納米粒具有良好的粒徑和電位以及較低的細(xì)胞毒性,其IC50為3.7μg﹒mL^-1。Q-PCR結(jié)果顯示DMP/siBcl-xl有效地降低了Bcl-xl信使RNA的水平;MTT結(jié)果顯示DMP/siBcl-xl(50nM和100nM)的生存率分別為69.6%±3.3%,56.3%±1.9%,低于DMP組;克隆形成實(shí)驗(yàn)表明DMP/siBcl-xl能夠抑制C26細(xì)胞的增殖,具有顯著的抗腫瘤活性;凋亡實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示DMP/siBcl-xl的細(xì)胞凋亡率為33.0%±3.8%,與對(duì)照組、DMP組、DMP/Scramble siRNA組比較,細(xì)胞凋亡率顯著地增加了。結(jié)論:納米粒DMP具有良好的粒徑和電位,并且具有較低的細(xì)胞毒性。DMP/siBcl-xl能夠沉默Bcl-xl基因,引發(fā)C26細(xì)胞的凋亡,進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)抑制C26細(xì)胞生長的治療作用。實(shí)驗(yàn)表明納米粒DMP能夠作為有效的載體遞送siRNA用于結(jié)腸癌的治療。
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