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全反式維甲酸對(duì)人結(jié)腸癌LoVo細(xì)胞化療藥物敏感性及Survivin基因表達(dá)的影響

作者:胡寶光; 鄭宗珩; 衛(wèi)洪波; 韓曉燕; 魏波; 黃江龍 中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院胃腸外科; 廣州510630

摘要:目的 探討全反式維甲酸(ATRA)對(duì)人結(jié)腸癌LoVo細(xì)胞化療藥物敏感性及Survivin表達(dá)的影響,為ATRA的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù).方法 應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)經(jīng)不同濃度(10-5、10-6、10-7mol/L)的ATRA作用不同時(shí)間(24、48、72 h及第5、9、15天)后結(jié)腸癌LoVo細(xì)胞的周期變化.將細(xì)胞分為ATRA組(10-6mol/L)和對(duì)照組(RPMI1640培養(yǎng)液常規(guī)培養(yǎng)),每組中分設(shè)不同濃度的5-氟尿嘧啶(5-FU,0、2、4、6 g/L)和絲裂霉素(MMC,0、200、400、600 mg/L)組,MTT法測(cè)定其活性,用以分析細(xì)胞對(duì)化療藥物敏感性變化,并利用交互效應(yīng)分析藥物之間的相互作用.應(yīng)用吖啶橙(AO)和溴化乙錠(EB)染色觀察對(duì)照組(RPMI1640培養(yǎng)液)、ATRA組(10-6mol/L)、5-FU組(4 g/L)、MMC組(400 mg/L)及ATRA(10+mol/L)+5.FU(4 g/L)組、ATRA(10-6 mol/L)+MMC(400 mg/L)組的細(xì)胞凋亡情況.免疫熒光技術(shù)測(cè)定對(duì)照組(RPMI1640培養(yǎng)液)和ATRA組(10-6mol/L)細(xì)胞中Survivin基因的表達(dá).結(jié)果 與對(duì)照組相比,不同濃度ATRA作用24 h后,Go-G1期細(xì)胞比例增加,48 h后達(dá)最高值,其后逐漸下降,而S期+G2.M期細(xì)胞比例則下降,48 h后達(dá)最低值,其后逐漸升高;在相同時(shí)間點(diǎn),10-6mol/LATRA作用最明顯.與對(duì)照組相比,10-6mol/LATRA降低了細(xì)胞存活率(P<0.05).對(duì)照組各濃度的5-FU細(xì)胞存活率明顯高于ATRA組(均P<0.05).而對(duì)照組加入不同濃度MMC后,在200 mg/L MMC濃度水平,細(xì)胞存活率低于ATRA組(0.72±0.02比1.03±0.13,P<0.05),但在400、600 mg/L MMC濃度水平,兩組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(0.52±0.05比0.39±0.02,0.36±0.02比0.36±0.01,均P>0.05).10-6西mol/L ATRA分別與5-FU(2、4、6 g/L)、MMC(200、400mg/L)存在正交互效應(yīng).與對(duì)照組、ATRA組、5-FU組、MMC組相比,熒光顯微鏡下ATRA+5-FU組、ATRA+MMC組的細(xì)胞出現(xiàn)明顯的體積縮小,核固縮,染色質(zhì)濃集并形成凋亡小體.與對(duì)照組相比,10-6mol/L ATRA作用48 h后細(xì)胞Sur

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