摘要:目的 探討神經(jīng)肽Y對大鼠心肌細(xì)胞ca2+-鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶Ⅱ(CaMK Ⅱ)的影響.方法 原代培養(yǎng)SD乳鼠心肌細(xì)胞,分為對照組(n=6)和神經(jīng)肽Y組(n=6),神經(jīng)肽Y組加入終濃度為100 nmol/L的神經(jīng)肽Y,對照組不進(jìn)行處理.處理15 min后采用同位素32P摻人法檢測心肌細(xì)胞CaMK Ⅱ活性,免疫印跡法(Western blotting)檢測磷酸化CaMK Ⅱ(p-CaMK Ⅱ)蛋白表達(dá);處理24 h后激光共聚焦顯微鏡下記錄心肌細(xì)胞靜息狀態(tài)下細(xì)胞核Ca2+-濃度,實時定量PCR檢測心肌細(xì)胞β-肌球蛋白重鏈(β-MHC)、心鈉素mRNA表達(dá).結(jié)果 神經(jīng)肽Y刺激心肌細(xì)胞15 min后,神經(jīng)肽Y組CaMK Ⅱ活性較對照組明顯升高(336 094.80±10 744.61比273 301.50±16 737.99,P<0.05),P-CaMK Ⅱ蛋白表達(dá)明顯增加.神經(jīng)肽Y刺激心肌細(xì)胞24 h后,神經(jīng)肽Y組心肌細(xì)胞胞核Ca2+-濃度較對照組明顯增加(226.87±17.37比84.04±6.50,P<0.01);實時定量PCR顯示β-MHC、心鈉素mRNA表達(dá)亦明顯增加.結(jié)論 神經(jīng)肽Y通過增加心肌細(xì)胞胞核Ca2+濃度活化CaMK Ⅱ.CaMK Ⅱ可能在神經(jīng)肽Y誘導(dǎo)心肌細(xì)胞肥大效應(yīng)中起著重要作用.
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