摘要:目的研究急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)患兒骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)對K562和K562/AO2細(xì)胞藥物耐受性的影響,并探討其機(jī)制。方法從白血病患兒骨髓中分離、培養(yǎng)并鑒定MSCs;建立K562和K562/AO2細(xì)胞株與MSCs共培養(yǎng)體系,觀察MSCs對2種細(xì)胞生長的影響;Annexin V—FITC檢測一定濃度的多柔比星對2種細(xì)胞凋亡的影響;流式細(xì)胞儀測定不同培養(yǎng)條件下的2種細(xì)胞周期;反轉(zhuǎn)錄PCR分析K562和K562/AO2細(xì)胞株的黏附培養(yǎng)組Bcl-2和Bax基因表達(dá);實時熒光定量PCR檢測2種細(xì)胞mdr1基因轉(zhuǎn)錄水平。結(jié)果與單獨(dú)培養(yǎng)的K562和K562/AO2細(xì)胞相比,與MSCs黏附共培養(yǎng)的白血病細(xì)胞生長較為緩慢,未見明顯的對數(shù)生長期;黏附共培養(yǎng)的白血病細(xì)胞,G?!獹。期細(xì)胞增多,s期細(xì)胞減少;K562和K562/AO2細(xì)胞株的黏附培養(yǎng)組Bcl-2基因表達(dá)強(qiáng)于懸浮組,此2組Bax基因表達(dá)均無顯著差異,K562/AO2細(xì)胞Bcl-2基因相對表達(dá)要強(qiáng)于K562細(xì)胞株;白血病細(xì)胞單獨(dú)懸浮培養(yǎng)組、黏附共培養(yǎng)組細(xì)胞mdr1基因轉(zhuǎn)錄水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P〉0.05)。結(jié)論白血病患兒MSCs能抑制白血病細(xì)胞株K562和K562/AO2生長,改變細(xì)胞周期而逃避藥物的促凋亡作用,K562/AO2對多柔比星產(chǎn)生耐藥性可能與黏附共培養(yǎng)后Bcl-2基因表達(dá)增強(qiáng)有關(guān),而與其本身含有的mdr1基因無關(guān)。
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