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微管相關(guān)新發(fā)突變基因MTUS1在心肌致密化過程中的作用機(jī)制

作者:白雪寒; 周元琳; 歐陽娜; 劉玲娟; 呂鐵偉; 田杰 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院心臟內(nèi)科兒童發(fā)育疾病研究教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室兒童發(fā)育重大疾病國(guó)家國(guó)際科技合作基地兒科學(xué)重慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 重慶400014

摘要:目的:探討新發(fā)突變基因微管相關(guān)腫瘤抑制因子1(microtubule-associated tumor suppressor 1,MTUS1)在心肌致密化過程中的作用機(jī)制。方法:構(gòu)建過表達(dá)慢病毒突變組MTUS1、野生組MTUS1及空載組(分別記為突變組、野生組及空載組)CP15-5a細(xì)胞模型,Real-time PCR檢測(cè)各組MTUS1及小GTPase RhoA(ras homolog family member A,RhoA)的m RNA表達(dá)水平,Western blot檢測(cè)各組RhoA蛋白表達(dá)水平,細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)各組α-tubulin熒光表達(dá)強(qiáng)度,并對(duì)各組細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn),檢測(cè)各組細(xì)胞遷移情況。結(jié)果:成功構(gòu)建過表達(dá)慢病毒突變組、野生組及空載組細(xì)胞模型。細(xì)胞免疫熒光結(jié)果顯示,與野生組相比,突變組細(xì)胞α-tubulin熒光強(qiáng)度表達(dá)下降(P=0.006)。Real-time PCR及Western blot結(jié)果顯示,與野生組相比,突變組RhoA的mRNA及蛋白表達(dá)水平明顯增高(P=0.005,P=0.01)。劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與野生組相比,突變組細(xì)胞在劃痕后6 h、12 h的遷移速率增快(均P=0.000)。結(jié)論:MTUS1新發(fā)突變是保護(hù)性突變,通過降低CP15-5a細(xì)胞微管穩(wěn)定性,并調(diào)節(jié)RhoA表達(dá)增強(qiáng)細(xì)胞遷移,從而減低心肌致密化不全的發(fā)生率。

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