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懸浮培養(yǎng)瑞香狼毒不定芽過(guò)程中黃酮和香豆素類(lèi)物質(zhì)的累積

作者:夏美玲; 姜紅; 郭雯華; 官旭杰; 由香玲 東北林業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院; 哈爾濱150040

摘要:本文以瑞香狼毒不定芽為材料,研究了在250 mL培養(yǎng)瓶懸浮培養(yǎng)過(guò)程中,影響其生長(zhǎng)及活性物質(zhì)(傘形花內(nèi)酯、東莨菪內(nèi)酯、總黃酮)積累的四類(lèi)因子(蔗糖濃度、培養(yǎng)基強(qiáng)度、接種量、接種長(zhǎng)度),初步建立了不定芽的懸浮培養(yǎng)體系。在此基礎(chǔ)上,研究了3 L生物反應(yīng)器內(nèi),影響不定芽生長(zhǎng)及活性物質(zhì)積累的因素(蔗糖濃度、6-BA濃度、初始接種量)。結(jié)果顯示,不定芽在250 mL培養(yǎng)瓶中懸浮培養(yǎng)周期是15 d,最佳蔗糖濃度、培養(yǎng)基強(qiáng)度、接種量、接種長(zhǎng)度分別是30 g·L^-1、MS培養(yǎng)基、1.0 g、3 cm。在此培養(yǎng)條件下,不定芽中傘形花內(nèi)酯、東莨菪內(nèi)酯和黃酮累積量都在15 d達(dá)到最大值,分別為0.351、0.035和2.459 mg。3 L生物反應(yīng)器內(nèi)不定芽懸浮培養(yǎng)周期為24 d,最佳培養(yǎng)條件為蔗糖30 g·L^-1、6-BA 0.5 mg·L^-1和初始接種量15 g。此條件下,傘形花內(nèi)酯、東莨菪內(nèi)酯和黃酮累積量分別為6.041、0.763和51.334 mg。本研究建立了瑞香狼毒不定芽的小型生物反應(yīng)器培養(yǎng)體系,為進(jìn)一步大規(guī)模培養(yǎng),高效生產(chǎn)上述三種活性物質(zhì)奠定了基礎(chǔ)。

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